Лабораторные методы диагностики
Показатель повреждения нейтрофилов (тест ППН по Фрадкину).Первоначально этот тест был предложен автором для диагностики туберкулиновой аллергии [Фрадкин В. А., 1962]. Однако позднее ряд исследователей с успехом использовали этот тест для диагностики как инфекционной, так и неинфекционной аллергии [Фрадкин В. А., Соломатина О. Г., 1963; Гюллинг Э. В., 1964; Карпов С. П., 1967; Чайка Н. А., 1969; Васильев О. А., 1970; Фрадкин В. А., Тетдоева М. Т., 1981; Фрадкин В. А., Прядкина М. Д., 1982; Хон-Те-Вон, 1981, и др.].Сущность метода состоит в усилении амебоидной активности нейтрофилов крови сенсибилизированных лиц при контакте со специфическим аллергеном. В настоящее время осуществляется выпуск ряда инфекционных аллергенов-диагностикумов специально для теста ППН.В 2 чистые пробирки вносят по 0,02 мл 5 % раствора натрия цитрата (контрольная) и 0,02 мл аллергена с цитратом.
Для каждой опытной и контрольной пробирки набирают микропипеткой по 0,08 мл крови. Кровь получают из пальца.
Пробирки осторожно встряхивают (для перемешивания) и ставят в термостат на 2 ч при 38 °С. Готовят мазки, которые обрабатывают для выявления гликогена по модификации Р. П. Нарциссова. Мазки фиксируют 96 % спиртом.
Перед использованием к спирту добавляют 40 % раствор нейтрального формалина (на каждые 10 мл 1 мл формалина). Фиксируют в течение 10 мин.Реакции на гликоген: 1) раствор перйодата — 20 мин; 2) промывание в дистиллированной воде — 2 мин; высушивание; 3) реактив Шиффа — 20 мин; 4) раствор гематоксилина — 10 мин; 5) промывание в проточной воде.По мнению авторов, рекомендуемый метод четко выявляет амебоидную активность не только в узких псевдоподиях, но и в широких лобоподиях [Фрадкин В. А. и др., 1980].Лабораторная диагностика включает также ряд методов, таких как реакция бластной трансформации лейкоцитов (БТЛ), тест розеткообразующих клеток (РОК), которые могут быть использованы в диагностике лекарственной, бактериальной и грибковой аллергии.